Monkeypox Iwoye Real Time PCR Kit

1. ApeereGbigba:Ayẹwo yẹ ki o gba sinu awọn tubes ti o ni ifo ilera ni ibamu

pẹlu boṣewa imọ ni pato.

2. Igbaradi Reagent (Agbegbe Igbaradi Reagent)

Mu awọn paati ohun elo naa jade, dọgbadọgba wọn ni iwọn otutu yara fun lilo imurasilẹ.

3. Iṣaṣaṣe Apeere (Agbegbe Iṣe Apeere)

3.1 Nucleic acid isediwon

O ti wa ni niyanju lati mu 200μL omi awọn ayẹwo, Rere Iṣakoso ati Negetifu Iṣakoso fun nucleic acid isediwon, ni ibamu si awọn ti o baamu ibeere ati ilana ti gbogun ti DNA isediwon ohun elo.

3.2 Lyophilized powder dissolving ati awoṣe afikun

Mura Iwoye Monkeypox Lyophilized premix ni ibamu si nọmba awọn ayẹwo.Apeere kan nilo tube PCR kan ti o ni lulú premix Lyophilized ninu.Iṣakoso odi & iṣakoso rere yẹ ki o ṣe itọju bi awọn apẹẹrẹ meji.

(1) Ṣafikun 15μL Dissolving Solution sinu kọọkan PCR tube ti o ni awọn Lyophilized premix, ki o si fi 5μL jade awọn ayẹwo / Iṣakoso odi/Rere Iṣakoso sinu kọọkan PCR tube lẹsẹsẹ.

(2) Bo awọn tubes PCR ni wiwọ, yi awọn tubes PCR pẹlu ọwọ titi ti lulú lyophilized yoo ti tuka patapata ati idapọ, gba omi naa si isalẹ ti awọn tubes PCR nipasẹ isunmọ iyara kekere lẹsẹkẹsẹ.

(3) Ti o ba lo ohun elo PCR gidi-akoko fun wiwa, lẹhinna gbe awọn tubes PCR taara si agbegbe imudara;ti o ba lo BTK-8 fun wiwa, lẹhinna nilo lati ṣe awọn iṣẹ wọnyi: gbigbe omi 10 μL lati inu tube PCR si chirún lenu daradara ti BTK-8.Ọkan PCR tube ni ibamu si ọkan daradara lori ërún.Lakoko iṣẹ pipetting, rii daju pe pipette jẹ awọn iwọn 90 inaro.Awọn imọran pipette idena aerosol yẹ ki o gbe si aarin kanga pẹlu agbara iwọntunwọnsi ati dawọ titari pipette nigbati o ba de jia akọkọ (lati yago fun awọn nyoju).Lẹhin ti awọn kanga ti wa ni kún, ya jade a lenu ni ërún awo ilu lati bo gbogbo awọn kanga ati awọn ërún ti wa ni ki o si gbe si awọn ampilifaya erin agbegbe.

4. PCR Amplification (Agbegbe Iwari)

4.1 Fi PCR tubes / chirún ifaseyin sinu ojò ifaseyin ati ṣeto awọn orukọ ti iṣesi kọọkan daradara ni ilana ti o baamu.

4.2 Eto ti erin fluorescence: (1) Monkeypox kokoro (FAM);(2) Iṣakoso inu (CY5).

4.3 Ṣiṣe ilana ilana gigun kẹkẹ atẹle

Ilana ti ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

 Ilana ti BTK-8:

5. Itupalẹ awọn abajade (jọwọ tọka si Itọsọna Olumulo Irinṣẹ)

Lẹhin iṣesi, awọn abajade yoo wa ni fipamọ laifọwọyi.Tẹ "Itupalẹ" lati ṣe itupalẹ, ati pe ohun elo yoo ṣe itumọ awọn iye Ct laifọwọyi ti ayẹwo kọọkan ninu iwe abajade.Awọn abajade iṣakoso odi ati rere yoo ni ibamu si atẹle naa "6. Iṣakoso Didara ".

6. Iṣakoso didara

6.1 Iṣakoso Negetifu: Ko si Ct tabi Ct> 40 ni ikanni FAM, Ct≤40 ni ikanni CY5 pẹlu igbi imudara deede.

6.2 Iṣakoso ti o dara: Ct≤35 ni ikanni FAM pẹlu iṣipopada imudara deede, Ct≤40 ni ikanni CY5 pẹlu igbi imudara deede.

6.3 Abajade jẹ wulo ti gbogbo awọn ibeere ti o wa loke ba pade.Bibẹẹkọ, abajade ko wulo.

Abajade Itumọ

Awọn abajade wọnyi ṣee ṣe:

AKIYESI: Ti abajade ti ko tọ ba waye, ayẹwo nilo lati gba ati idanwo lẹẹkansi.